ダイレクト RT-qPCR キット
キットの説明:
◮ Foregene が開発した Foreasy Reverse Transcriptase および Foreasy HS Taq DNA Polymerase を使用した Direct RT-qPCR キットと独自の反応バッファーにより、このキットは強力な耐性と適合性を備え、Foregene Lysis システムをテンプレートとして使用して反応を直接テストできます。このキットは、新型コロナウイルス感染症（COVID-19）核酸検出キットやその他の病原性細菌核酸検出キットの開発に応用できます。
説明
ダイレクト RT-qPCR キットは、個別にパッケージ化された RT-qPCR バッファーと高効率酵素を提供します混合物(Taq、M-MLV、RI)を使用できるため、バックエンドキットやシステムの作成に便利です調整、簡単な確認の範囲内で。
仕様
500T、50,000T
キットのコンポーネント
| キット内容 (20μL反応系) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500T | 50,000トン | |
| 直接酵素混合物 | 500μL×1 | 50mL×1 |
| 2× ダイレクト RT-qPCR バッファー | 1mL×5 | 500mL×1 |
| 命令 | 1 | 1 |
操作手順
試薬を調製する前に、キット内のすべての試薬を室温で解凍し、穏やかに混合する必要があります。
A: 準備 of レンプレート と 試薬
1. 準備済みの RNA テンプレート (RNA テンプレートの抽出と精製には Foregene Total RNA Isolation Kit シリーズのキットを使用することをお勧めします) またはサンプルクラッキング製品 (Foregene Lysis システムの使用をお勧めします)、特定のプライマー (10 μM) およびその他の関連する消耗品、器具を準備します。
2. 2× ダイレクト RT-qPCR バッファー、RNase フリー ddH2O、および 20× ROX 参照色素 (存在する場合) を入れます。'必要）を氷の入ったボックスに入れて自然に溶かし、静かに混ぜます。
B: 準備 of RT-qPCR システム
テーブル 1 : 準備 of RT-qPCR sシステム
| 成分 | 音量 | 最終濃度 |
| 2× ダイレクト RT-qPCR バッファー | 10μL | 1× |
| 直接酵素混合物 | 1μL | |
| フォワードプライマー(10μM) | 0.8μL | 50-900nM |
| リバースプライマー(10μM) | 0.8μL | 50-900nM |
| プローブ(4μM) | 1μL | 200nM |
| テンプレート(RNAまたはライセート) | XμL | |
| 20×ROX 参照染料 | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X)μL | |
| 全容積 | 20μL |
C: 設定 の RT-qPCR 反応 プログラム
テーブル 2 : RT-qPCR 反応するon プログラム 設定 (ために 例: 二-ステップ 方法)
| ステップ | 温度 | 時間 | サイクル | コンテンツ | |
| 1 | 50℃ | 15分 | 1* | 1 | 逆転写 |
| 2 | 95℃ | 1分 | 1 | 変性前 | |
| 3 | 95℃ | 10秒 | 40-45 | 変性 | |
| 60℃ | 30秒2* | アニール/伸長 | |||
保管と賞味期限
-キットは-20度で保管してください。± 5℃。有効期間は12ヶ月です。
- 凍結融解サイクルの繰り返しは避けてください (5 サイクル未満)。
