QuickEasyᵀᴹ リアルタイム PCR キット - Taqman
説明
2×クイックイージーTMQuickEasy によって提供される Real PCR Mix-TaqmanTMReal Time PCR Kit-Taqman キットは、特定の蛍光プローブを使用したリアルタイム PCR 増幅反応用に設計された新世代のマスター ミックス システムです。そのコアである Foregene HS Taq DNA ポリメラーゼは抗体修飾に基づいており、Foregene と組み合わせて使用するとさらに最適化された PCR システムとなり、より高い特異性と増幅効率を実現します。通常のPCRミックスに比べて増幅能力が強く、ミスマッチ率が低くなります。蛍光定量的 PCR 反応に使用して、非特異的増幅を低減し、PCR の精度を向上させることができます。製品の特異性と反応感度を大幅に向上させることができます。同時に、ROX を内部標準色素として提供しました。
クイックイージーTMリアルタイム PCR キット-Taqman キットは、鋳型量の適用範囲が広く、さまざまな定量領域で良好な標準曲線を取得でき、再現性が高く信頼性の高い標的遺伝子を正確に定量および検出できます。
仕様
200 の準備、500 の準備、1000 の準備、2000 回の準備
キットのコンポーネント
クイックイージーTMリアルタイム PCR キット - Taqman(20μlシステム) | ||||
キット内容 | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
200 の準備 | 500 の準備 | 1000 回の準備 | 2000 回の準備 | |
2×素早い簡単TM リアルPCR ミックス-タクマン | 1mL×2 | 1.7mL×3 | 1.7mL×6 | 1.7mL×12 |
20×ROX 参照色素 | 200μL | 0.5mL | 1mL | 1mL×2 |
DNase フリー ddH2O | 1.7mL | 1.7mL×2 | 10mL | 20mL |
もしあなたが | 1ピース | 1ピース | 1ピース | 1ピース |
特徴と利点
■ 独自の PCR 最適化システムにより 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman の互換性がさらに高まりました。
■ ホットスタート Foregene HS Taq ポリメラーゼは、より高い増幅効率、より高い増幅感度、およびより高い増幅特異性を備えています。
■2× クイックイージーTM Real PCR Mix -Taqman は、Foregene によって最適化された独自のシステムを使用して、配列特異的プローブ検出の感度と特異性を向上させます。これは、遺伝子型決定およびコピー数変異の決定に使用でき、正確な結果を得ることができます。
■ この製品には ROX 内部参照色素が付属しており、ウェル間のシグナルバックグラウンドやシグナルエラーを除去するために使用できるため、お客様がさまざまなタイプの定量 PCR 機器で使用するのに便利です。
キットの適用
■ テンプレート定量分析のための蛍光定量的 PCR。
■C従来のPCR増幅。
■ アレル検出に使用可能.
保管と賞味期限
キットは-20℃の暗所で保管してください。頻繁に使用する場合は、短期間であれば 4°C で保存することもできます (10 日以内に使い切ってください)。
リアルタイム PCR プライマーの設計原則
フォワードプライマーとリバースプライマー
リアルタイム PCR では、プライマーの設計が非常に重要です。プライマーは PCR 増幅の特異性と効率に関係しており、次の原則を参照して設計できます。
プライマーの長さ: 18-30bp。
GC 含有量: 40 ~ 60%。
Tm 値: Primer 5 などのプライマー設計ソフトウェアにより、プライマーの Tm 値が得られます。上流プライマーと下流プライマーの Tm 値は可能な限り近い必要があります。Tm の計算式、Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T) も使用できます。PCR を実行する場合、一般にプライマー Tm 値の 5 °C より低い温度がアニーリング温度として選択されます (対応するアニーリング温度の上昇により、PCR 反応の特異性が高まる可能性があります)。
プライマーと PCR 産物:
設計プライマーPCR増幅産物の長さは100〜150bpであることが好ましい。
テンプレートの二次構造領域にプライマーを設計することは、できる限り避けるべきです。
上流プライマーと下流プライマーの 3' 末端間に 2 つ以上の相補的な塩基が形成されないようにします。
プライマー 3' 末端塩基は、さらに 3 つの連続する G または C がある場合には存在できません。
プライマー自体は相補的な構造を持つことができません。そうしないとヘアピン構造が形成され、PCR 増幅に影響を及ぼします。
ATCG はプライマー配列内でできるだけ均一に分布する必要があり、3' 末端塩基は T として避ける必要があります。
付録 1:Cell Direct RT-qPCR Kit コンポーネント サプリメント パック
1.細胞溶解液
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キットのコンポーネント (24ウェル溶解システム/ウェル) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100T | 500T | ||
部私 | バッファCL | 20ml | 100ml |
フォアジーン プロテアーゼ プラス II | 400μl | 1ml×2 | |
バッファST | 1ml×2 | 10ml | |
部Ⅱ | DNAイレイサー | 400μl | 1ml×2 |
2.RTミックス
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キットのコンポーネント (20μl反応系) | DRT-01011-B1 |
200T | |
5× ダイレクト RT ミックス | 800μl |
RNase フリー ddH2O | 1.7ml×2 |
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キットのコンポーネント (20μl反応系) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200T | 1000T | |
2× ダイレクト qPCR ミックス-SYBR | 1ml×2 | 1.7ml×6本 |
50× ROX 参照染料 | 40μl | 200μl |
RNase フリー ddH2O | 1.7ml | 10ml |