Lnc-RT Heroᵀᴹ I(gDNaseあり)(lncRNAからのファーストストランドcDNA合成用スーパープレミックス)
仕様
25×20μl Rxns、50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (gDNase 付き) は、ゲノム DNA 汚染を迅速に除去するために lncRNA 用に特別に開発された逆転写システムです。5x gDNase Mix は、42℃、2 分間で RNA に残っているゲノムを迅速に除去し、qPCR 結果に対するゲノムの干渉を効果的に回避します。
5×L-RT HeroTM ミックスには、Foregene が特別に開発した Foregene LncRNA 逆転写酵素が含まれています。これは、lncRNA およびその他の長い RNA 複合テンプレートに特化した新しいタイプの逆転写酵素であり、より強い RNA 親和性とより高い反転記録効率を備えています。最適化されたシステムにより、逆転写速度が速くなり、高い GC 含有量と複雑な二次構造を持つ RNA テンプレートを容易に転写できます。第 1 鎖 cDNA 合成は 42℃ で 15 分で完了します。
キットのコンポーネント
| 5× gDNase ミックス |
| 5× L-RT HeroTM ミックス |
| RNaseフリーのddH2O |
| 手順 |
特徴と利点
■効率的な gDNA 除去機能。2 分以内にテンプレート内の gDNA を除去できます。
■ lncRNA の逆転写を効率的に行うことができます。逆転写産物をqPCRにかける場合、従来の逆転写系に比べてCt値が低くなります。
■ 効率的な逆転写システムにより、ファーストストランド cDNA の合成が完了するまでにわずか 15 分しかかかりません。
■ 複雑なテンプレート: GC 含有量が高く、複雑な二次構造を持つテンプレートも高効率で反転できます。
■ 高感度逆転写システムにより、pg レベルのテンプレートでも高品質の cDNA を取得できます。
■ 逆転写系は熱安定性が高く、最適反応温度は42℃です。℃50 であっても良好な逆転写パフォーマンスを維持します。℃.
キットの適用
lncRNA相対定量分析。
lncRNAの絶対定量分析。
RNAウイルスなどの微量RNAを迅速かつ正確に解析できます。
高い GC 含有量または複雑な二次構造を持つ RNA テンプレートの逆転写。
作業の流れ
保管と賞味期限
キットは-20℃で保管してください。°C. -20℃の恒温冷蔵庫に保管してください。°C 受け取り直後。保管条件が適切であれば、1 年間の有効期間中、製品の性能が低下することはありません。
問題分析ガイド
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-特異的な増幅
1. 無理なプライマー設計
推奨事項: プライマー設計原則に従ってプライマーを設計します。
2. ゲノム残基。
提案: gDNA 除去の最初のステップの反応温度が 42°C であることを確認し、反応時間を 5 分間に延長することもできます。
RT-qPCR によるシグナルの増幅なし
1. RNA が分解されます。
推奨事項: RNA 抽出用の材料はできるだけ新鮮である必要があり、高品質で高純度の RNA を使用する必要があります。
2. RNA には阻害剤が含まれています。
推奨事項: 逆転写阻害剤には、通常、SDS、グアニジン塩、EDTA などが含まれます。阻害剤を除去するには、RNA 沈殿を 70% エタノールで洗浄することをお勧めします。
3. プライマー設計の問題。
推奨事項: プライマー設計原則に従って、検査用にプライマーを再設計します。
ターゲットバンドがブランクコントロールに表示されます
1. 操作ツールまたは試薬の汚染。
推奨事項: 実験用のすべての試薬または器具はオートクレーブ滅菌する必要があります。DNA サンプルがピペットに吸い込まれたり、遠心分離管からこぼれたりしないように、取り扱うときは慎重かつ優しく扱ってください。
2. PCR 反応系の準備中に汚染が発生した。
推奨事項: 取り扱う際には、ラテックス手袋の着用、フィルターチップの使用など、必要な予防措置を講じてください。Real Time PCR Mix は汚染のないシステムで使用してください。
3. プライマーが劣化している。
提案: SDS-PAGE 電気泳動を使用してプライマーが分解されているかどうかを検出し、蛍光検出実験用に新しいプライマーに交換してください。
取扱説明書：
Lnc-RT HeroTM I(gDNaseあり)(lncRNAからファーストストランドcDNA合成用スーパープレミックス) 取扱説明書
