植物 DNA 分離キット ゲノム植物 DNA 精製キット 試薬プロトコル
仕様
50 回の準備、100 回の準備、250 回の準備
このキットは、DNA に特異的に結合できる DNA 専用カラム、Foregene プロテアーゼ、および独自の緩衝システムを使用しており、植物ゲノム DNA の精製を大幅に簡素化します。ゲノムDNAの分解を避け、30分以内で高品質なゲノムDNAを取得できます。
スピンカラムに使用されている DNA 専用シリカゲル膜は、Foregene 独自の新素材であり、効果的かつ特異的に DNA に結合し、RNA、不純物タンパク質、イオン、多糖、ポリフェノール、その他の有機化合物を最大限に除去できます。
製品のコンポーネント
| バッファPL1、バッファPL2 |
| バッファPW、バッファWB、バッファEB |
| フォアジーンプロテアーゼ |
| DNA のみのカラム |
| 手順 |
特徴と利点
■ RNase 汚染なし: キットに付属の DNA 専用カラムを使用すると、実験中に追加の RNase を使用せずにゲノム DNA から RNA を除去でき、外因性 RNase による研究室の汚染を防ぎます。
■ 高速: Foregene プロテアーゼは、同様のプロテアーゼよりも活性が高く、組織サンプルをより速く消化します。
■ シンプル: ゲノム DNA 抽出操作は 30 分で完了します。
■ 便利：遠心分離は室温で行われ、4℃の低温遠心分離やDNAのエタノール沈殿は必要ありません。
■ 安全性: 有機試薬は必要ありません。
■ 高品質: 精製されたゲノム DNA は大きな断片を持ち、RNA や RNase を含まず、イオン含有量が非常に低いため、さまざまな実験の要件を満たすことができます。
キットの適用
新鮮または冷凍植物組織からのゲノム DNA の抽出および精製に適しています。
作業の流れ
ダイアグラム
保管と賞味期限
キットは室温 (15 ～ 25 ℃) で 12 ヶ月、それより長い場合は 2 ～ 8℃ で保存できます。
Foregene Protease Plus ソリューションは独自の配合を採用しており、室温で長期間 (3 か月) 保管しても効果が発揮されます。で保存すると活性と安定性が向上します。4℃なので、4℃での保管をお勧めします。-20℃での保管は避けてください。
問題分析ガイド
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the extraction of plant genomic DNA, hoping to be helpful to your experiments. In addition, for other experimental or technical problems other than operation instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us: 028-83360257 or E-mali: Tech@foregene.com.
収量が低い、または DNA がない
通常、ゲノム DNA の収量に影響を与える要因には、サンプルの供給源、サンプルの古さ、サンプルの保管条件、操作などがあります。
抽出中にゲノム DNA を取得できませんでした
1. 組織サンプルが不適切に保存されているか、保存期間が長すぎるため、ゲノム DNA が劣化します。
推奨事項: 組織サンプルは液体窒素または -20 度で保存してください。°C;ゲノム DNA 抽出には新しく収集したサンプルを使用してみてください。
2. サンプル量が少なすぎると、対応するゲノム DNA が抽出されない可能性があります。
提案: 長期間保存されていた組織サンプルや重度のゲノム DNA 分解がある組織サンプルの場合、かなりのゲノム DNA を抽出するために組織サンプルの量を適切に増やすことができます。サンプルの量は DNA のニーズに応じて決定できますが、新鮮なサンプルは 100 mg を超えてはならず、乾燥サンプルは 30 mg を超えてはなりません。
3. サンプルを液体窒素で粉砕したり、液体窒素の後に長時間放置したりしないでください。
提案: DNA 抽出中、細胞壁を破壊するためにサンプルを液体窒素で完全に粉砕する必要があります。粉砕後、65℃に予熱したPL1にサンプル粉末を移してください。°（粉砕した粉末が溶けると、ゲノム DNA は急速に分解され始めます）。
4. Foregene Protease を不適切に保管すると、活性が低下または不活性化されます。
推奨事項: Foregene Protease の保管条件を確認するか、酵素加水分解のために新しい Foregene Protease と交換してください。
5. キットが不適切に保管されているか、保管期間が長すぎるため、キット内の一部のコンポーネントが故障します。
推奨事項: 関連する操作のために、新しい植物ゲノム DNA 抽出キットを購入してください。
6. キットの不適切な使用。
提案: 植物ゲノム DNA の抽出および精製用のサンプル専用の植物 DNA 分離キットを購入してください。
7. WB を追加せずにバッファリングする無水 エタノール。
推奨事項: 必ず正しい量の無水エタノールを Buffer WB に加えてください。
8. 溶離液がシリカ膜に正しく滴下されませんでした。
提案: 65 度に予熱した溶離液を追加します。℃溶出効率を高めるため、シリカゲル膜の中央まで滴下し、室温で5分間放置します。
低収量のゲノム DNA を取得するための抽出
1. サンプルが不適切に保存されているか、保存期間が長すぎるため、ゲノム DNA が劣化します。
推奨事項: 組織サンプルは -20 度で保管してください℃;ゲノム DNA 抽出には新しく採取した組織サンプルを使用してみてください。
2. 組織サンプルの量が少なすぎると、抽出されるゲノム DNA が少なくなります。
提案: 藻類などの水生植物など、一部の植物サンプルには水分が豊富に含まれているため、投与量を適切に増やすか、操作前に水を少し脱水することができます。
3. サンプルが液体窒素で完全に粉砕されていないか、粉砕後に室温に長時間放置されていました。
提案: 液体窒素の粉砕は十分でなければならず、サンプルセル壁は可能な限り破壊されるべきです。粉砕直後にサンプル粉末を65℃に移す必要があります。℃次のステップのためにバッファ PL1 を予熱します。
4. 正しいキットを使用していない。
推奨事項: 植物ゲノム DNA を抽出および精製するには、専用の植物 DNA 分離キットを使用してください。
5. Foregene Protease を不適切に保管すると、活性が低下または不活性化されます。
推奨事項: Foregene Protease の保管条件を確認するか、酵素加水分解のために新しい Foregene Protease と交換してください。
6. 溶離液の問題
推奨: 溶出にはバッファー EB を使用してください。ddHを使用する場合2O またはその他の溶離液の場合、溶離液の pH が 7.0 ～ 8.5 であることを確認してください。
7. 溶離液が正しく滴下されていない
提案: 溶出効率を高めるために、シリカ膜の中央に溶出ドロップを追加し、室温で 5 分間放置してください。
8. 溶離液量が少なすぎる
提案: ゲノム DNA 溶出には、説明書に従って少なくとも 100 以上の溶離液を使用してください。μl.
低純度で抽出されたゲノム DNA
ゲノム DNA の純度が低いと、酵素を切断できなかったり、PCR で目的の遺伝子断片を取得できなかったりするなど、後続の実験が失敗したり効果が低下したりします。
1. その他のタンパク質コンタミネーション、RNA コンタミネーション。
分析: カラムの洗浄にバッファー PW は使用されませんでした。正しい遠心速度でカラムを洗浄するためにバッファー PW が使用されませんでした。
提案: 上清をカラムに通すときに上清に沈殿がないことを確認してください。必ず指示に従って精製カラムを Buffer PW で洗浄してください。このステップは省略できません。
2. 不純物イオン汚染。
分析: Buffer WB 洗浄カラムが省略されているか、1 回のみ洗浄されたため、イオン汚染が残留しました。
推奨: 残留イオンを可能な限り除去するために、指示に従って Buffer WB で必ず 2 回洗浄してください。
3. RNase の汚染。
分析: 外因性 RNase がバッファーに追加されます。Buffer PW での洗浄操作が正しくないと、RNase が残留し、in vitro 転写などの下流の RNA 実験操作に影響を与えます。
提案: Foregene シリーズの核酸抽出キットは、追加の RNase なしで RNA を除去でき、Plant DNA Isolation Kit のすべての試薬は RNase を必要としません。必ず指示に従って精製カラムを Buffer PW で洗浄してください。このステップは省略できません。
4. エタノール残留物。
分析: 精製カラムをバッファー WB で洗浄した後、空のチューブの遠心分離は実行されませんでした。
推奨事項: 空のチューブを適切に遠心分離するための指示に従ってください。
取扱説明書：
