未精製サンプル用の 2 倍濃縮プレミックスの中国メーカー リアルタイム定量 PCR ダイレクト マルチプレックス プローブ Qpcr Mix Plus U
当組織は、「科学的管理、高品質と効率の第一主義、未精製サンプル用の2倍濃縮プレミックス、リアルタイム定量PCRダイレクトマルチプレックスプローブQpcr Mix Plus Uの中国メーカーにとって最高の購入者」という手順コンセプトを維持しており、当社のビジネスは、重要で安全な最高品質の製品を積極的な価格で顧客に提供し、すべての顧客が当社のサービスに満足できるようにすることに専念しています。
組織は「科学的管理、高品質と効率の優先、購入者至上主義」という手順のコンセプトを維持しています。中国 Taq DNA ポリメラーゼおよび Qpcr, 当社は豊富な戦力を有し、安定した万全の販売網体制を有しております。私たちは、国内外のすべてのお客様と相互利益に基づく健全なビジネス関係を構築したいと考えています。
リアルタイム PCR プライマーの設計原則
フォワードプライマーとリバースプライマー
リアルタイム PCR では、プライマーの設計が非常に重要です。プライマーは PCR 増幅の特異性と効率に関係しており、次の原則を参照して設計できます。
- プライマーの長さ: 18-30bp。
- GC 含有量: 40 ~ 60%。
- Tm 値: Primer 5 などのプライマー設計ソフトウェアにより、プライマーの Tm 値が得られます。上流プライマーと下流プライマーの Tm 値は可能な限り近い必要があります。Tm の計算式、Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T) も使用できます。PCR を実行する場合、一般にプライマー Tm 値の 5 °C より低い温度がアニーリング温度として選択されます (対応するアニーリング温度の上昇により、PCR 反応の特異性が高まる可能性があります)。
- プライマーと PCR 産物:
- 設計プライマーPCR増幅産物の長さは100〜150bpであることが好ましい。
- テンプレートの二次構造領域にプライマーを設計することは、できる限り避けるべきです。
- 上流プライマーと下流プライマーの 3' 末端間に 2 つ以上の相補的な塩基が形成されないようにします。
- プライマー 3' 末端塩基は、さらに 3 つの連続する G または C がある場合には存在できません。
- プライマー自体は相補的な構造を持つことができません。そうしないとヘアピン構造が形成され、PCR 増幅に影響を及ぼします。
- ATCG はプライマー配列内でできるだけ均一に分布する必要があり、3' 末端塩基は T として避ける必要があります。
付録1:CエルダイレクトRT-qPCR キットの構成品tサプリメントパック
1.細胞溶解液
細胞溶解液 | |||
キットのコンポーネント (24ウェル溶解システム/ウェル) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100T | 500T | ||
部私 | バッファCL | 20ml | 100ml |
フォアジーン プロテアーゼ プラス II | 400μl | 1ml×2 | |
バッファST | 1ml×2 | 10ml | |
部Ⅱ | DNAイレイサー | 400μl | 1ml×2 |
RTミックス | |
キットのコンポーネント (20μl反応系) | DRT-01011-B1 |
200T | |
5× ダイレクト RT ミックス | 800μl |
RNase フリー ddH2O | 1.7ml×2 |
qPCRミックス | ||
キットのコンポーネント (20μl反応系) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200T | 1000T | |
2× ダイレクト qPCR ミックス - Taqman | 1ml×2 | 1.7ml×6本 |
20× ROX 参照色素 | 40μl | 200μl |
RNase フリー ddH2O | 1.7ml | 10ml |
当組織は、「科学的管理、高品質と効率の第一主義、未精製サンプル用の2倍濃縮プレミックス、リアルタイム定量PCRダイレクトマルチプレックスプローブQpcr Mix Plus Uの中国メーカーにとって最高の購入者」という手順コンセプトを維持しており、当社のビジネスは、重要で安全な最高品質の製品を積極的な価格で顧客に提供し、すべての顧客が当社のサービスに満足できるようにすることに専念しています。
中国メーカー中国 Taq DNA ポリメラーゼおよび Qpcr, 当社は豊富な戦力を有し、安定した万全の販売網体制を有しております。私たちは、国内外のすべてのお客様と相互利益に基づく健全なビジネス関係を構築したいと考えています。
リアルタイム PCR プライマーの設計原則
フォワードプライマーとリバースプライマー
リアルタイム PCR では、プライマーの設計が非常に重要です。プライマーは PCR 増幅の特異性と効率に関係しており、次の原則を参照して設計できます。
- プライマーの長さ: 18-30bp。
- GC 含有量: 40 ~ 60%。
- Tm 値: Primer 5 などのプライマー設計ソフトウェアにより、プライマーの Tm 値が得られます。上流プライマーと下流プライマーの Tm 値は可能な限り近い必要があります。Tm の計算式、Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T) も使用できます。PCR を実行する場合、一般にプライマー Tm 値の 5 °C より低い温度がアニーリング温度として選択されます (対応するアニーリング温度の上昇により、PCR 反応の特異性が高まる可能性があります)。
- プライマーと PCR 産物:
- 設計プライマーPCR増幅産物の長さは100〜150bpであることが好ましい。
- テンプレートの二次構造領域にプライマーを設計することは、できる限り避けるべきです。
- 上流プライマーと下流プライマーの 3' 末端間に 2 つ以上の相補的な塩基が形成されないようにします。
- プライマー 3' 末端塩基は、さらに 3 つの連続する G または C がある場合には存在できません。
- プライマー自体は相補的な構造を持つことができません。そうしないとヘアピン構造が形成され、PCR 増幅に影響を及ぼします。
- ATCG はプライマー配列内でできるだけ均一に分布する必要があり、3' 末端塩基は T として避ける必要があります。
付録1:CエルダイレクトRT-qPCR キットの構成品tサプリメントパック
1.細胞溶解液
細胞溶解液 | |||
キットのコンポーネント (24ウェル溶解システム/ウェル) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100T | 500T | ||
部私 | バッファCL | 20ml | 100ml |
フォアジーン プロテアーゼ プラス II | 400μl | 1ml×2 | |
バッファST | 1ml×2 | 10ml | |
部Ⅱ | DNAイレイサー | 400μl | 1ml×2 |
RTミックス | |
キットのコンポーネント (20μl反応系) | DRT-01011-B1 |
200T | |
5× ダイレクト RT ミックス | 800μl |
RNase フリー ddH2O | 1.7ml×2 |
qPCRミックス | ||
キットのコンポーネント (20μl反応系) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200T | 1000T | |
2× ダイレクト qPCR ミックス - Taqman | 1ml×2 | 1.7ml×6本 |
20× ROX 参照色素 | 40μl | 200μl |
RNase フリー ddH2O | 1.7ml | 10ml |
取扱説明書: