PCR 法と核酸検査ラボにおける核酸エアロゾル汚染はコインの裏表のようなものです。私たちはそれを持つか持たないかを選択することしかできませんが、それを望むか使うかは選択できません。

1. DNA除去剤のスクリーニング

核酸エアロゾル汚染を空間的に除去するには、まず液体状態で核酸を除去できる DNA 除去剤をスクリーニングする必要があります。本当に効果のある DNA 除去剤はそれほど多くないからです。実験方法については、DNAリムーバーを研究室の「秘密コーナー」にするわけにはいかない！

この実験では、100コピー/μL（CT約31）のASFVプラスミドとデジタルPCRで定量したDNAリムーバーを等量混合し、室温でそれぞれ10分間、20分間、30分間反応させた。核酸抽出後、qPCR増幅を行った。プラスミドと水を混合したポジティブコントロールを比較しました。実験は同時に完了したわけではないため、結果間にある程度の差異が生じる可能性がありますが、実験の結論には影響しません。これまでに、市販の DNA 除去製品 10 製品を評価してきました。液体状態でプラスミド DNA を効果的に分解できるのは、No. 1、No. 6、No. 8 製品のみです。他の製品はほとんど効果がありません。

表1 市販DNA除去剤の核酸除去効果

2. 一般的に使用されている消毒剤のDNA除去効果実験

1. 一般的に使用される消毒剤のスクリーニング

研究室で一般的に使用される消毒剤には、アルデヒド、フェノール、アルコール、第 4 級アンモニウム塩、過酸化物、塩素製剤、酸および塩基など、さまざまな種類があります。これらの消毒剤の微生物に対する消毒効果は実験により十分に検証されていますが、核酸の分解効果については十分な実験データがありません。核酸検査ラボでは、微生物に対して優れた消毒効果を発揮するだけでなく、DNA を分解できる消毒剤が必要です。試験結果は、84 消毒剤とトリクロロイソシアヌル酸と 1 M 塩酸の 2 つの塩素製剤のみが要件を満たしていることを示しています。1 M 塩酸は腐食性が高いため、核酸検査機関の廃棄物処理には塩素製剤を使用することが推奨されます。ただし、塩素製剤は金属を腐食させるため、器具や器具の消毒には使用できません。

表 2 各種消毒剤の DNA 除去効果

2. 塩素系製剤の最低有効濃度

塩素系消毒剤は DNA を分解する強力な効果がありますが、金属の腐食性と刺激性があるため、床、非金属製のカウンタートップ、浸漬チップ、遠心分離管、その他の検査項目の洗浄に使用できます。

「新型冠状肺炎流行性消毒技術ガイドライン」によると： 汚染物質（患者の血液、分泌物、嘔吐物） 有効塩素 5g/L～10g/L 塩素含有消毒剤。床、壁、物体の表面には有効塩素 1g/L の塩素消毒剤を使用します。衣類、寝具、その他の繊維製品は、まず有効塩素 0.5g/L の塩素消毒剤に 30 分間浸漬し、その後通常どおり洗浄します。

表3 塩素系消毒剤の濃度別のDNA除去効果

試験結果は、有効塩素濃度が 1.2 g/L 以上の場合、塩素含有消毒剤は 5 分間使用すると 100 コピー/μL のプラスミドを完全に分解できることを示しています。有効塩素濃度が 0.6 g/L 以上の 84 消毒剤は、10 分間作用すると 100 コピー/μL のプラスミドを完全に分解できます。

3. 核酸エアロゾル汚染空気除去実験

核酸エアロゾルによって汚染された空気を浄化するにはどうすればよいでしょうか?ほとんどの考えは、エアロゾルで汚染された環境を作り出してからそれを浄化するか、または汚染後に核酸を浄化することです。私にとって、再現できず、実験結果を定量的に分析できない実験は無意味であるため、空気消毒剤のいくつかの方法を借りました。「GB27948-2020 空気消毒剤の一般要件」および「消毒技術仕様」を参照してください。

1. 試験材料

1.1 DNA リムーバー: この実験では、表 1 の 2 つの市販の DNA リムーバー 6 および 8 を選択しました。

1.2 試験プラスミド: ほとんどの実験室汚染の CT 値が 30 を超えることを考慮すると、今回使用した ASFV 遺伝子プラスミドの濃度は約 100 コピー/μL、蛍光定量 PCR CT は約 31.07 です。プラスミドを植毛綿棒に加え、自然乾燥させます。

1.3 試験装置：Bilingkehan KVBOX 消毒装置は、Shenzhen Runlian Environmental Technology Co., Ltd. のご厚意によりサポートされており、過酸化水素消毒剤による優れた空気消毒性能を備えており、胞子やその他の微生物を効果的に殺すことができます。

1.4 テストスペース: 約 0.1 立方メートルの密閉された転送ウィンドウ。

2. 試験方法

消毒機にセットされる消毒剤の量は 10ml、濃度は 100ml/m3 で、「GB27948-2020 空気消毒剤の一般要件」よりもはるかに高く、エアゾールスプレー消毒を使用する場合、消毒剤の量は 10ml/m3 以下である必要があります。