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PCR、RT-PCR、qPCR、RT-qPCR の違いは何ですか
PCR は、少量の DNA テンプレートから DNA を増幅するために使用される方法です。RT-PCR では、逆転写を使用して RNA ソースから DNA テンプレートを生成し、それを増幅します。PCR および RT-PCR は通常エンドポイント反応ですが、qPCR および RT-qPCR は生成物の合成速度の反応速度を使用します。続きを読む -
創薬の最前線：RNAを低分子で狙う
ファイザーの新型コロナウイルスに対するmRNAワクチンは、リボ核酸（RNA）を治療標的として使用する熱意を再燃させた。しかし、低分子で RNA を標的にすることは非常に困難です。RNA には、アデニン (A)、シトシン (C)、グアニン (G)、そしてチミンの代わりとなるウラシル (U) の 4 つの構成要素しかありません。続きを読む -
核酸医薬品とは何ですか？
「核酸医薬品」は、遺伝情報を制御するDNAやRNAなどの物質を指す「核酸」を医薬品として利用したものです。これらにより、従来の低分子医薬や抗体医薬では標的とすることができなかったmRNAやmiRNAなどの分子を標的とすることが可能になり、...続きを読む -
RT-PCR における siRNA に関する経験
1. 基礎知識（実験パートを見たい場合は、直接後半へ移動してください） リアルタイムPCRは、従来のPCRの派生反応として、主にPCR増幅の各サイクルにおける増幅産物量の変化を監視します。リアルタイムでの反応続きを読む -
RT-PCR実験反応系最適化手法詳細まとめ
一、反応系の感度を高める： 1. 高品質の RNA を分離する： cDNA 合成の成功は高品質の RNA から得られます。高品質の RNA は少なくとも全長であり、EDTA や SDS などの逆転写酵素阻害剤が含まれていない必要があります。RNA の品質によって、最大量が決まります。続きを読む -
完全な PCR プライマー設計と PCR の詳細
プライマー設計の基礎 (99% の問題を解決できる) 1. プライマーの長さ: 教科書では 15 ～ 30 bp、通常は約 20 bp が必要です。実際の条件では、特異性を確保するには 18 ～ 24 bp が望ましいですが、長ければ長いほど良いため、長すぎるプライマーも特異性を低下させ、収率を低下させます。2.プリム...続きを読む -
先輩ドクターが丁寧にまとめたqRT-PCRの注意事項
qRT-PCR 実験の原理、プライマー設計、結果の解釈などについて皆さんが話していますが、私は qRT-PCR の実験操作について共有する必要があると思います。小さいことですが、結果が大事です。qRT-PCR を行う前に、以下のことを明確に理解する必要があります。続きを読む -
RT-qPCR の注意事項
RT-qPCR 実験には、RNA 抽出と品質評価、逆転写、qPCR の 3 つのステップが含まれており、各ステップには多くの注意事項があります。以下で詳しく紹介します。Ⅰ．RNA の品質評価 RT-qPCR 実験では、RNA 抽出完了後、...続きを読む -
リアルタイム PCR の徹底入門
1. 初期理解 この段階では、先輩たちの前で間違いを避けるために、次のような概念と用語を理解する必要があります。 Q: RT-PCR、qPCR、リアルタイム PCR、リアルタイムRT-PCRは？回答: RT-PCR は逆転写 PCR (逆転写 PCR) です。続きを読む -
PCR、マルチPCR、In situ PCR、リバースPCR、RT-PCR、qPCR（1）- PCR
PCR、マルチPCR、In situ PCR、Reverse PCR、RT-PCR、qPCR（1） – PCR 各種PCR Ⅰの概念、手順、内容を整理します。PCR ポリメラーゼ連鎖反応 (PCR と呼ばれる) は、特定の DNA 断片を拡大するために使用される分子生物学的技術です。それは...とみなすことができます。続きを読む -
qRT-PCRの実験原理
RT-qPCR は通常の PCR 技術を発展させたものです。従来の PCR 反応システムに蛍光化学物質 (蛍光色素または蛍光プローブ) を追加し、異なる発光メカニズムに従って PCR のアニーリングおよび伸長プロセスをリアルタイムで検出します。蛍光標識…続きを読む -
RT-PCR実験反応系最適化手法詳細まとめ
Ⅰ．反応系の感度を高めます: 1. 高品質 RNA を分離します: cDNA 合成の成功は高品質 RNA から得られます。高品質の RNA は、少なくとも全長が長く、EDTA や SDS などの記録酵素を含まない阻害剤を含まない必要があります。資格は...続きを読む
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