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序章:

RNA 分子は、タンパク質、DNA、RNA などの他の生体分子と広範囲に相互作用することができるため、高分子複合体の形で細胞や生物内に存在します。中でも、RNA-タンパク質複合体はRNAの存在と機能を担う重要な形態の一つです。RNA プルダウンは、RNA 分子、特に lncRNA 分子の相互作用タンパク質をスクリーニングおよび同定するための古典的な方法であり、大多数の研究者および国際的な権威ある学術誌によって認められています。今日、FORREGENE は RNA プルダウンの実験原理と技術プロセスを共有します。おそらくそれを使用できるでしょう。

1. RNA プルダウン技術の実験原理:

ビオチン標識された標的 lncRNA または lncRNA フラグメント (ポジティブおよびネガティブ コントロールとして使用される RNA フラグメントを含む) の in vitro 転写および合成、および細胞抽出物とのインキュベート。アビジンを固定した磁気ビーズを使用して、RNA-タンパク質またはRNA-RNA複合体を収集します。十分に洗浄した後、複合体は溶出されます。lncRNAと相互作用するタンパク質標的分子を検出する場合は、RNAプルダウン産物に対してタンパク質電気泳動を実行し、銀染色によって標的タンパク質を検出し、質量分析用にゲルを切断します。プルダウン製品に対してウェスタンブロット検証を直接実行することもできます。lncRNA と相互作用する RNA 標的分子の場合、RNA プルダウン産物は RNA 抽出に供され、特異的な qRT-PCR 検出が実行されます。

2.RNAプルダウン技術の実験プロセス:

新しい

3.FOREGENEのRNAプルダウンのテクニカルサービス:

細胞培養

全細胞/核/血漿タンパク質抽出物の調製

RNAプルダウン実験

SDS-PAGE電気泳動、銀染色

質量分析とWB実験

実験報告書

4. 実験例

次の図は、FJ Bio-Bio の RNA プルダウンと SDS-PAGE 電気泳動検出の結果を示しています。赤い矢印は差分バンドを示しています。

新しい2

四川大学のSong Xu教授の研究グループは、lncRNA研究の分野で15年にわたる長期にわたる蓄積を蓄積してきました。Foregene Bio と Song Xu 教授の研究グループは、実験に満足のいく結果をもたらす lncRNA の RNA プルダウン技術を開始するために協力しました。


投稿時間: 2021 年 6 月 11 日