ホットスタート Taq 酵素は広く使用されています。通常の DNA ポリメラーゼと比較して、ホットスタート Taq 酵素は一部の非特異的増幅とプライマーダイマーの形成を効果的に回避し、標的遺伝子増幅の成功率を効果的に向上させることができます。特に遺伝子検査の分野では、ホットスタート Taq 酵素が業界の必須標準として認識されており、通常の DNA ポリメラーゼは使用すべきではありません。上記からわかるように、ホットスタート Taq 酵素は広く使用されています。現在、国内市場には多くのブランドのホットスタートTaq酵素がありますが、高品質のホットスタートTaq酵素は多くありません。話題の Taq 酵素製品が数多くある中、どのように選べばよいでしょうか?

1. 増幅効率の高いホットスタート Taq 酵素を選択する

PCR 増幅効率は、Taq 酵素の性能と密接に関係しています。優れた Taq 酵素反応系が最適化された後、増幅効率は 95% 以上になり、初期鋳型量の増幅範囲が広くなります。標的遺伝子の含有量が少ない場合には良好な増幅が得られますが、鋳型量が多く、指数関数的増幅期間が長い場合には中毒しにくくなります。性能の悪い Taq 酵素の場合、反応系を何度最適化しても増幅効率は 90% 未満であり、増幅曲線の S 字型が目立たず、傾きが小さく、曲線が平坦です。テンプレートの量が少ないと増幅できず、テンプレートの量が多いと増幅効果が理想的ではありません。したがって、PCR および qPCR の成功には、増幅効率の高い DNA ポリメラーゼの選択が重要です。

2.酵素力の強いホットスタートTaq酵素を選択

Taq 酵素の酵素力は増幅効率に関係します。一般に、ホットスタート Taq 酵素の酵素力が強いほど、PCR 増幅の指数関数的増殖期間が長くなり、より典型的な「S 字」曲線になり、蛍光シグナル値が高くなり、マルチプレックス PCR 検出により適します。酵素力が弱いブランド DNA ポリメラーゼは、通常 2 重反応のみをサポートします。3 重反応を行う場合、増幅曲線が低く、蛍光シグナル値も低く、典型的な増幅曲線がないため、結果の判断が困難です。

3. 高感度のホットスタート Taq 酵素を選択する

一般に、DNAポリメラーゼは増幅効率が高く、感度も高いと言われていますが、矛盾もあります。増幅するサンプルの標的遺伝子の存在量が少ない場合は、Taq 酵素の増幅感度をテストすることをお勧めします。最も一般的な検出方法は、標的遺伝子プラスミド断片を10倍または5倍の勾配希釈し、より低い希釈率でPCR検出を行い、検出感度の高いホットスタートTaq酵素を選択する方法です。

上記のことから、研究者は自身の実験要件と資金条件に応じて選択する必要があることがわかります。ホットスタート Taq 酵素の増幅効率と感度を検出するには、勾配希釈増幅実験を行うのが最善です。

フォアジーンの例'Taq DNA ポリメラーゼ:

Foreasy HS Taq DNA ポリメラーゼ

説明

Foreasy HS Taq DNA Polymerase は、遺伝子組換え技術により大腸菌改変細菌に発現させた DNA ポリメラーゼです。この酵素は独自の反応緩衝液と組み合わされているため、製品の耐性と適合性が高く、サンプル ライセート (Foregene Lysis システム) を検出反応のテンプレートとして直接使用できます。

応用

精製テンプレートおよび非精製テンプレートの定性 PCR および定量 PCR 検出。

品質管理

1.外因性ヌクレアーゼ活性は検出されません

2.宿主を介さずに残存ゲノムDNAを検出するPCR法

3.ヒトゲノム内の単一コピー遺伝子を効果的に増幅できます。

4. 室温で 1 週間保管しますが、明らかな活性変化はありません。

製品詳細：https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/