考えられる問題の次の分析は、頬側綿棒/FTA card DNA extraction is helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali:Tech@foregene.com.

精製カラムが詰まっている

このキットでは、ゲノム DNA 抽出操作において、遠心分離ステップを行わずに精製カラムをサンプルの酵素溶解混合物に直接吸着させますが、不完全な酵素化やサンプルの高粘度により精製カラムがブロックされる可能性があります。

考えられる原因は次のとおりです。

1. 組織サンプルの不完全な酵素消化。

推奨事項: Foregene Protease のサンプル処理時間を適切に延長するか、12,000 rpm (~13,400 rpm) での遠心分離後に上清を採取することができます。× g) 5分間。

2. 組織サンプルまたは大きな組織の過剰な使用。

推奨事項: 1 を超えないことが最善です頬側 サンプル内の綿棒。サンプルが大きすぎる場合は、それに応じてバッファー ST1、Foregene Protease、バッファー ST2 の投与量を増やしてください。

3. サンプルの粘度が高すぎます。

推奨事項: ゲノム DNA 抽出前に、サンプルを 10 mM Tris-HCl で適切に希釈できます。

4. 血液カードの破片が吸引されています。

推奨事項: ブラッドスポット (FTA カード) ゲノム抽出のステップ 6 の一時遠心時間は、適切に延長できます。

収量が低い、または DNA がない

多くの場合、ゲノム DNA の収量に影響を与えるさまざまな要因 (サンプルの起源、サンプルの保存条件、サンプルの調製、操作など) が存在します。

抽出中にゲノム DNA を取得できない

考えられる原因は次のとおりです。

1. サンプルの不適切な保存や長期間の保管は、ゲノム DNA の分解につながります。

推奨事項: 口腔綿棒はできれば新たに採取する必要があり、保存した綿棒をゲノム DNA 抽出操作に使用することはお勧めできません。血痕サンプルは品質が保証されていることを確認し、保管期間が長すぎないようにする必要があります。

2. 組織の使用量が少なすぎると、対応するゲノム DNA が抽出されない可能性があります。

推奨事項: 以下に従ってください。ブッカl 操作ガイドのスワブサンプリングの指示に従って、ゲノム DNA 抽出に十分な細胞が口腔スワブに付着できるように、できるだけ何度も拭きます。血痕サンプルの抽出では、血痕の切断領域を適切に増やすことができます。

3. Foregene Protease が不適切に保存されると、その活性が低下または不活化されます。

推奨事項: 保管条件を確認してください。Foregene Protease を使用するか、酵素反応用の新しい Foregene Protease に置き換えます。

4. キットの保存が不適切であったり、保管時間が長すぎたりすると、キット内の一部のコンポーネントが故障することがあります。

推奨: 新しいものを購入する頬側 綿棒DNA隔離 関連手順のキット。

5. Buffer WB には無水エタノールは添加されません。

推奨事項: バッファー WB に正しい量の無水エタノールが加えられていることを確認してください。

6. 溶離液がシリコン膜に正しく添加されていません。

推奨: 65 を追加℃予熱した溶離液をシリコン膜の中央に滴下し、室温で 5 分間放置して溶出効率を高めます。

L低収量ゲノム DNA 孤立した

考えられる原因は次のとおりです。

1. サンプルの不適切な保存や長期間の保管は、ゲノム DNA の分解につながります。

推奨事項: 口腔スワブは新たに採取することが好ましく、保存されたスワブはゲノム DNA 抽出には使用しないでください。

2. 組織サンプルの量が少なすぎると、抽出されるゲノム DNA の量が少なくなります。

推奨事項: 操作ガイドの口腔スワブのサンプリング手順に従い、ゲノム DNA 抽出に十分な細胞が口腔スワブに付着できるように、できるだけ何度も拭き取ってください。

3. Foregene Protease が不適切に保存されると、その活性が低下または不活化されます。

推奨事項: 保管条件を確認してください。the Foregene プロテアーゼまたは新しいプロテアーゼと交換する 酵素反応用のForegene Protease。

4. 溶離液の問題。

推奨事項: 溶出にはバッファー EB を使用してください。ddHを使用する場合₂O またはその他の溶離液では、溶出液の pH が 7.0 ～ 8.5 であることを確認します。

5. 溶出液が正しく滴下されていません。

推奨事項: 溶出効率を高めるために、溶離液をシリコン膜の中央に滴下し、室温で 5 分間放置します。

6. 溶出液の蓄積が少なすぎます。

推奨事項: 少なくとも説明書の要求に従って、ゲノム DNA 溶出には溶離液を使用してください。劣らず 15歳以上μl.

Lすごい純粋さ of ゲノムDNA孤立した

ゲノム DNA の純度が低いと、酵素を切断できない、PCR で目的の遺伝子断片を取得できないなど、下流の実験で失敗や不満足な結果が生じる可能性があります。

考えられる原因は次のとおりです。

1. 異種タンパク質汚染、RNA 汚染。

分析: 精製カラムはバッファー PW を使用して洗浄されませんでした。Buffer PW 洗浄精製カラムが正しい遠心速度を使用して洗浄されていませんでした。

推奨事項: エタノールを添加する前に、上清に沈殿がないことを確認してください。必ず指示に従って精製カラムを洗浄してください。このステップは省略できません。

2. 不純物イオン汚染。

分析: バッファー WB 洗浄精製カラムが省略されているか、1 回のみ洗浄されたため、イオン汚染が残留しました。

推奨事項: 残留イオンをできるだけ除去するために、指示に従って Buffer WB を必ず 2 回洗浄してください。

3. RNA 酵素の汚染。

分析: 外来 RNase をバッファーに追加しました。バッファー PW 洗浄操作が正しくなかったため、RNase 残基が生じ、インビトロ転写などの下流の RNA 実験操作に影響を及ぼしました。

推奨品：Foregeneシリーズの核酸イソラションキットは、RNase を追加せずに RNA を除去できます。したがって 口腔スワブ/FTA カード DNA 分離キット必要な't RNaseを追加します。Buffer PW洗浄精製カラムの説明書に従ってください。この工程は省略できません。

4. エタノール残留物。

分析: バッファー WB は、精製カラムの洗浄​​後に空のチューブの遠心分離を実行しませんでした。

推奨事項: 指示に従って正しい空チューブ遠心操作を実行してください。

5. その他の不純物汚染。

分析: 保存されたサンプルまたは特別なサンプルは前処理されません。

推奨事項: 指示に従ってサンプルを徹底的に前処理してください。