植物葉ダイレクト PCR キット-UNG (サンプリングツールなし) プロトコル 植物材料からのダイレクト PCR
キットの説明:
葉または葉のライセートを PCR 増幅のテンプレートとして直接使用し、DNA を別途抽出することなく、高速かつ高感度です。誤検知を防ぐために、UNG 汚染防止システムが追加されました。
◮時間と費用のかかるDNA精製が不要（時間、労力、コストの節約！）
◮材料が少なくなる
◮シンプル - サンプルを切断したり粉砕したりすることなく、PCR 反応または溶解反応にかけることができます。
◮2 X 混合 - サンプルローディングエラーと反応システムの準備時間を削減します
◮高速 - テンプレートの調製は 10 分で完了し、PCR 反応は 50 分で完了できます。
◮ハイスループット - 溶解反応は 96 ウェル PCR プレートで完了可能
説明
Plant Leaf Direct PCR キットをベースに、dTTP の代わりに dUTP を使用し、dUTP を含む鋳型を分解できる UNG 酵素を追加しています。このようにして、増幅の特異性と精度が確保され、大規模な遺伝子検査中に発生する可能性のある PCR 産物の汚染の問題が防止されます。
仕様
50×20μl rxns、200×20μl rxns、500×20μl rxns、2000×20μl rxns
キットのコンポーネント
| パート I | バッファP1 |
| バッファP2 | |
| 6×DNAローディングバッファー | |
| パート II | 2× リーフ PCR イージーTMミックス(UNG) |
特徴と利点
■ 時間と費用のかかる DNA 精製は不要です
■ 材料が少ない
■ シンプル - サンプルを切断したり粉砕したりすることなく、PCR 反応や溶解反応を行うことができます。
■ 2 × 混合により、サンプルローディングエラーと反応システムの準備時間を削減します。
■ 高速テンプレート調製は 10 分で完了、PCR 反応は最短 50 分で完了可能
■ 96 ウェル PCR プレートでハイスループットの溶解反応を完了可能
キットパラメータ
応用：遺伝子組み換えの同定、ジェノタイピングなど。
サンプル: 植物の葉
投与量：直径2～3mm（直接法）、直径5～7mm（溶解法）
検出範囲: ターゲットフラグメント ≤ 1kb
作業の流れ
エレクトロフェログラム
PCR増幅産物が混入した状態での2週間のPCR Mix検出結果。
