W: 兄弟、逆転写が完了し、いよいよ最後のステップである蛍光定量 PCR です!ねえ、お兄さん、リアルタイム定量 PCR とは何ですか?
M:PCRはいつも知っていますよね？
女性:ご存知のように、PCR はポリメラーゼ連鎖反応であり、DNA を増やす技術です。
M:それはほぼ… 特定のプライマーを介して標的配列を100万倍以上に増幅する技術的手法ですが、これは標的配列の有無を示すだけであり、最初の鋳型の量を決定することはできません。蛍光定量 PCR は、この問題を解決するために開発された技術手法です。一般にリアルタイム PCR および定量 PCR (qPCR) と呼ばれます。
W：通常のPCRとの違いは蛍光の定量化にあるのでしょうか？
M:はい、つまり各PCRサイクルの延長段階で蛍光シグナル強度が検出され、そのシグナル強度の変化に応じて初期テンプレート量を算出することができます。
女性：とても複雑な気持ちですね！これは自分で計算する必要がありますか?
M:これはゆっくり学ぶ必要があります。原理を理解できることが最善です。ここで、まず CT 値に注目します。これは比較的直感的な実験データであり、そのサイズは初期テンプレート量のサイズに対応します。増幅曲線や融解曲線などのグラフもあります。彼らはあなたの実験が成功するかどうかの最終決定権を持っています。
女性: ああ、お兄さん。それではqPCR実験をしてみます！
M: 試薬エリアにテンプレートを追加しないように特に注意してください。そうしないと、未使用の混合物が簡単に汚染されてしまいます。
女性：分かった！

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